Diagnosen akromegali er ganske enkel (men bare når du tenker på det), siden det innebærer å ta en blodprøve for å bestemme nivået av GH og IGF-1. Ved akromegali er det et høyt nivå av IGF-1 og GH, vel vitende om at sekresjonen av GH normalt er intermitterende, men at den ved akromegali alltid er høy fordi den ikke lenger er regulert. Den definitive laboratoriediagnosen er basert på glukosetesten. Siden glukose normalt reduserer utskillelsen av GH, gjør oral administrering av glukose det mulig å oppdage, ved påfølgende blodprøver, at ved akromegali forblir utskillelsen av veksthormon høy.

Når hypersekresjonen av GH er bekreftet, er det nødvendig å finne opprinnelsen. I dag er gullstandarden en MR av hjernen som kan vise en svulst i hypofysen. I svært sjeldne tilfeller er det en svulst lokalisert andre steder (oftest i hjernen, lungen eller bukspyttkjertelen) som skiller ut et annet hormon som virker på hypofysen, GHRH, som stimulerer produksjonen av GH. Deretter foretas en mer omfattende vurdering for å finne opprinnelsen til denne unormale sekresjonen.