ELISA -test: hva er prinsippet?

ELISA -test: hva er prinsippet?

Definisjon: hva er ELISA-testen?

Den koblede enzymimmunabsorpsjonsanalyseteknikken – på engelsk Enzyme-Linked Immuno Assay – eller ELISA-testen er en immunologisk test som tillater påvisning eller analyse av molekyler i en biologisk prøve. Den ble konseptualisert og utviklet av to svenske forskere, Peter Perlmann og Eva Engvall ved Stockholms universitet i 1971.

Molekylene analysert ved hjelp av ELISA-metoden er vanligvis proteiner. Og prøvetyper inkluderer flytende biologiske materialer - plasma, serum, urin, svette -, cellekulturmedier eller et rekombinant protein - protein produsert av en celle hvis genetiske materiale har blitt endret ved genetisk rekombinasjon - renset til løsning.

ELISA-testen brukes hovedsakelig i immunologi for å oppdage og/eller måle tilstedeværelsen av proteiner, antistoffer eller antigener i en prøve. Denne serologiske testen oppdager spesielt antistoffene som produseres av kroppen som respons på viral kontaminering.

Prinsippet for ELISA-testen for infeksjonssykdommer

Bruken av antistoffer for diagnostisering av infeksjonssykdommer representerer en spesifikk og rask metode. ELISA-teknikken er en immuno-enzymatisk teknikk som gjør det mulig å visualisere, fra en biologisk prøve, reaksjonene mellom et antigen – en kropp som anses som fremmed av den levende organismen – og et antistoff ved hjelp av en fargereaksjon produsert av en enzymmarkør – generelt alkalisk fosfatase og peroksidase – tidligere festet til antistoffet. Fargereaksjonen bekrefter identifiseringen av den isolerte bakterien eller tilstedeværelsen av det ønskede viruset og intensiteten av fargen gir en indikasjon på mengden antigener eller antistoffer i den gitte prøven.

De forskjellige typene ELISA-tester

Det er fire hovedtyper av ELISA-test:

  • ELISA direkte, gjør det mulig å oppdage eller måle antistoffer. Den bruker bare et primært antistoff;
  • ELISA indirekte, den mest brukte, gjør det også mulig å oppdage eller analysere antistoffer. Den bruker et sekundært antistoff som gir den bedre følsomhet enn direkte ELISA;
  • ELISA i konkurranse, tillater dosering av antigener. Produsert av konkurranse om bindinger, bruker den ikke et enzym;
  • ELISA «i sandwich», tillater dosering av antigener. Denne teknikken brukes ofte i forskning.

Bruker ELISA-testen

ELISA-testen brukes til:

  • Finn og mål antistoffer i serologi for diagnostisering av infeksjonssykdommer: virologi, parasitologi, bakteriologi, etc.;
  • Doser proteiner i lave konsentrasjoner: spesifikke doser av visse plasmaproteiner (immunoglobulin E (IgE), ferritin, proteinhormoner, etc.), tumormarkører, etc.;
  • Doser små molekyler: steroidhormoner, skjoldbruskhormoner, medikamenter ...

De vanligste tilfellene: Covid-19, Dengue, HIV, Lyme, allergier, graviditet

ELISA-testen brukes spesielt til å diagnostisere mange infeksjonssykdommer:

Seksuelt overførbare sykdommer (STD)

Inkludert hepatitt, syfilis, klamydia og HIV. Anbefalt av helsemyndighetene, det er den viktigste AIDS-screeningstesten: den viser tilstedeværelsen av anti-HIV-antistoffer og p24-antigenet seks uker etter infeksjon.

Regionale eller endemiske sykdommer

Gul feber, Marburg-virussykdom (MVM), Ladengue, Lyme-sykdom, Chikungunya, Rift Valley-feber, Ebola, Lassa-feber, etc.

Covid-19

For å utføres mer enn 2 til 3 uker etter symptomdebut, gjør ELISA-testen det mulig å identifisere, på mindre enn en time, tilstedeværelsen av anti-SARS-CoV-2-antistoffer.

Virale patogener som forårsaker prenatale infeksjoner

Toxoplasmose, røde hunder, cytomegalovirus, herpes simplex for eksempel.

Andre saker

Men han har også funnet applikasjoner innen deteksjon:

  • Graviditeter;
  • Autoimmune sykdommer;
  • Matallergener: den kvantitative bestemmelsen av totale immunglobuliner E (IgE) hjelper til med vurdering og behandling av allergier;
  • Hormonelle forstyrrelser;
  • Tumormarkører;
  • Plantevirus;
  • Og mange flere

Pålitelighet av Covid-19-testen

Som en del av påvisningen av anti-SARS-CoV-2-antistoffer, bekrefter en pilotstudie utført i august 2020 av Institut Pasteur, CNRS, Inserm og University of Paris påliteligheten til ELISA-testen: begge ELISA-testene ble testet. hele N-proteinet til SARS-CoV-2 (ELISA N) eller det ekstracellulære domenet til virustoppen (S) som målantigener. Denne teknikken vil gjøre det mulig å identifisere antistoffer i mer enn 90 % av tilfellene, med en svært lav falsk-positiv rate på 1 %.

Pris og refusjon av ELISA-testen

Utført i analyselaboratorier på resept, koster Elisa-tester rundt 10 euro og refunderes med 100 % av helsetrygden.

Utføres i gratis informasjons-, screenings- og diagnostiske sentre (CeGIDD), kan de være gratis for HIV og SARS-CoV-2.

Legg igjen en kommentar