Innhold
- ELISA -test: hva er prinsippet?
ELISA -test: hva er prinsippet?
Definisjon: hva er ELISA-testen?
Den koblede enzymimmunabsorpsjonsanalyseteknikken – på engelsk Enzyme-Linked Immuno Assay – eller ELISA-testen er en immunologisk test som tillater påvisning eller analyse av molekyler i en biologisk prøve. Den ble konseptualisert og utviklet av to svenske forskere, Peter Perlmann og Eva Engvall ved Stockholms universitet i 1971.
Molekylene analysert ved hjelp av ELISA-metoden er vanligvis proteiner. Og prøvetyper inkluderer flytende biologiske materialer - plasma, serum, urin, svette -, cellekulturmedier eller et rekombinant protein - protein produsert av en celle hvis genetiske materiale har blitt endret ved genetisk rekombinasjon - renset til løsning.
ELISA-testen brukes hovedsakelig i immunologi for å oppdage og/eller måle tilstedeværelsen av proteiner, antistoffer eller antigener i en prøve. Denne serologiske testen oppdager spesielt antistoffene som produseres av kroppen som respons på viral kontaminering.
Prinsippet for ELISA-testen for infeksjonssykdommer
Bruken av antistoffer for diagnostisering av infeksjonssykdommer representerer en spesifikk og rask metode. ELISA-teknikken er en immuno-enzymatisk teknikk som gjør det mulig å visualisere, fra en biologisk prøve, reaksjonene mellom et antigen – en kropp som anses som fremmed av den levende organismen – og et antistoff ved hjelp av en fargereaksjon produsert av en enzymmarkør – generelt alkalisk fosfatase og peroksidase – tidligere festet til antistoffet. Fargereaksjonen bekrefter identifiseringen av den isolerte bakterien eller tilstedeværelsen av det ønskede viruset og intensiteten av fargen gir en indikasjon på mengden antigener eller antistoffer i den gitte prøven.
De forskjellige typene ELISA-tester
Det er fire hovedtyper av ELISA-test:
- ELISA direkte, gjør det mulig å oppdage eller måle antistoffer. Den bruker bare et primært antistoff;
- ELISA indirekte, den mest brukte, gjør det også mulig å oppdage eller analysere antistoffer. Den bruker et sekundært antistoff som gir den bedre følsomhet enn direkte ELISA;
- ELISA i konkurranse, tillater dosering av antigener. Produsert av konkurranse om bindinger, bruker den ikke et enzym;
- ELISA «i sandwich», tillater dosering av antigener. Denne teknikken brukes ofte i forskning.
Bruker ELISA-testen
ELISA-testen brukes til:
- Finn og mål antistoffer i serologi for diagnostisering av infeksjonssykdommer: virologi, parasitologi, bakteriologi, etc.;
- Doser proteiner i lave konsentrasjoner: spesifikke doser av visse plasmaproteiner (immunoglobulin E (IgE), ferritin, proteinhormoner, etc.), tumormarkører, etc.;
- Doser små molekyler: steroidhormoner, skjoldbruskhormoner, medikamenter ...
De vanligste tilfellene: Covid-19, Dengue, HIV, Lyme, allergier, graviditet
ELISA-testen brukes spesielt til å diagnostisere mange infeksjonssykdommer:
Seksuelt overførbare sykdommer (STD)
Inkludert hepatitt, syfilis, klamydia og HIV. Anbefalt av helsemyndighetene, det er den viktigste AIDS-screeningstesten: den viser tilstedeværelsen av anti-HIV-antistoffer og p24-antigenet seks uker etter infeksjon.
Regionale eller endemiske sykdommer
Gul feber, Marburg-virussykdom (MVM), Ladengue, Lyme-sykdom, Chikungunya, Rift Valley-feber, Ebola, Lassa-feber, etc.
Covid-19
For å utføres mer enn 2 til 3 uker etter symptomdebut, gjør ELISA-testen det mulig å identifisere, på mindre enn en time, tilstedeværelsen av anti-SARS-CoV-2-antistoffer.
Virale patogener som forårsaker prenatale infeksjoner
Toxoplasmose, røde hunder, cytomegalovirus, herpes simplex for eksempel.
Andre saker
Men han har også funnet applikasjoner innen deteksjon:
- Graviditeter;
- Autoimmune sykdommer;
- Matallergener: den kvantitative bestemmelsen av totale immunglobuliner E (IgE) hjelper til med vurdering og behandling av allergier;
- Hormonelle forstyrrelser;
- Tumormarkører;
- Plantevirus;
- Og mange flere
Pålitelighet av Covid-19-testen
Som en del av påvisningen av anti-SARS-CoV-2-antistoffer, bekrefter en pilotstudie utført i august 2020 av Institut Pasteur, CNRS, Inserm og University of Paris påliteligheten til ELISA-testen: begge ELISA-testene ble testet. hele N-proteinet til SARS-CoV-2 (ELISA N) eller det ekstracellulære domenet til virustoppen (S) som målantigener. Denne teknikken vil gjøre det mulig å identifisere antistoffer i mer enn 90 % av tilfellene, med en svært lav falsk-positiv rate på 1 %.
Pris og refusjon av ELISA-testen
Utført i analyselaboratorier på resept, koster Elisa-tester rundt 10 euro og refunderes med 100 % av helsetrygden.
Utføres i gratis informasjons-, screenings- og diagnostiske sentre (CeGIDD), kan de være gratis for HIV og SARS-CoV-2.